Trong giai đoạn này, ở châu Mỹ phát triển nhiều nền văn hóa khác nhau. Vào khoảng năm 100 CN, thị quốc Teotihuacán đã lớn mạnh và thống trị Mexico.
Ngoại trừ các chuyến ghé chân của cư dân quần đảo Polynesia ở Thái Bình Dương tới Peru vào thế kỷ IV, châu Mỹ hoàn toàn cô lập với phần còn lại của thế giới. Mặc dù vậy, Teotihuacán, nổi tiếng với Kim tự tháp Mặt trời khổng lồ, là thành phố lớn thứ năm trên thế giới với 200.000 dân.
Một vài cộng đồng văn hóa đã từng tồn tại nơi đây. Các thổ dân da đỏ vùng Đồng bằng, có cuộc sống du mục và săn bò rừng bison, sống ở vùng Trung Tây, còn các bộ lạc miền rừng sống ở khu vực Đông Bắc. Ở lưu vực sông Mississippi, nền văn hóa Hopewell với nghề chế tạo đồ đồng và buôn bán đã suy tàn vào khoảng năm 500 CN. Còn ở vùng Tây Nam, các cộng đồng người Mogollon và Hobokam sống thành làng và có nghề trồng ngô phát triển mạnh. Ven biển miền Tây và ở miền Bắc, các cộng đồng săn bắn, đánh cá và hái lượm đơn sơ hơn như những người Makah và Inuit cũng phát triển.
Các nền văn minh sơ khai nhất ở Mexico là của người Olmec (1200-300 TCN) và người Zapotec (1400-400 TCN). Người Zapotec nổi tiếng về kiến thức và là những người châu Mỹ đầu tiên phát minh ra chữ viết (800 TCN). Họ có hệ lịch chính xác mà sau này họ dạy cho người Maya và người dân ở Teotihuacán.
Khi nền văn minh của người Olmec và người Zapotec suy tàn, thị quốc Teotihuacán, thành lập vào khoảng năm 200 TCN, đã lớn mạnh và thống trị Mexico năm 100 TCN. Ở đỉnh cao vào 600 năm sau đó, thành Teotihuacán rộng lớn hơn cả thành Rome cổ đại. Thành phố được xây dựng theo một hệ thống mạng lưới có quy hoạch với quần thể đền thờ và kim tự tháp rất ấn tượng, nhiều xưởng thủ công, các khu chợ buôn bán và cả những khu sinh sống dành cho người nước ngoài. Đây là trung tâm thương mại lớn nhất ở châu Mỹ, kết nối và cung cấp hàng hóa cho cả Bắc Mỹ lẫn Nam Mỹ. Teotihuacán có ảnh hưởng đến các nền văn hóa khác của Mexico, chẳng hạn như nền văn hóa Maya. Teotihuacán nhập khẩu nguyên liệu cả từ những nơi xa như vùng Ngũ Đại Hồ và Colombia. Có các thành phố khác vây quanh nhưng thành Teotihuacán yên bình một cách lạ thường. Khoảng năm 600 CN, nó suy tàn một cách bí hiểm, tuy nhiên người Aztecs sau này có kế tục di sản của Teotihuacán.
Ở Equador, nhà nước Moche, lúc đỉnh cao phát triển vào khoảng năm 300 CN, người ta đã làm được đồ gốm, hàng dệt và ngũ kim tinh xảo. Xa hơn về phía Nam, thành phố Tiahuanaco nằm ở độ cao 3.660 mét so với mặt nước biển, cạnh hồ Titicaca trong rặng núi Andes, có nhiều ngôi đền, cung điện bằng đá khổng lồ với khoảng 40.000 dân sinh sống. Được thành lập khoảng năm 300 TCN, thành phố này đạt tới thời kỳ hoàng kim vào khoảng năm 500 CN.
350 TCN Các thị quốc đầu tiên của người Maya xuất hiện
300 TCN Tiahuanaco, Peru, được thành lập (đỉnh cao khoảng năm 500 CN, suy tàn khoảng năm 1000)
200 TCN Teotihuacán được thành lập (đỉnh cao khoảng năm 500)
200 TCN Văn hóa Moche, bờ biển Peru (đỉnh cao khoảng năm 300, bị xâm chiếm năm 700)
100 TCN Văn hóa Hopewell (đỉnh cao khoảng năm 300, chấm dứt khoảng năm 800)
300 CN Bắt đầu thời kỳ Cổ đại của nền văn minh Maya (kéo dài đến năm 800)
300 CN Văn hóa Mogollon (Bắc Mỹ)
400 CN Văn hóa Hohokam ở Bắc Mỹ (kéo dài đến năm 1450)